صبغة غرام Gram stain لإكتشاف البكتيريا
صبغة غرام Gram stain لإكتشاف البكتيريا
صبغة غرام من أهم الأصباغ المستخدمة في العيادات والمستشفيات للتعرف على البكتيريا. اكتشف الطبيب الدنماركي هانز جرام تلطيخ الجرام في عام 1880 للتمييز بين أنواع البكتيريا. يتم تحديد لون التلوين البكتيري من خلال التركيب الكيميائي لجدران الخلايا التي تختلف فيها البكتيريا في اللون. حتى تتمكن من معرفة كيفية عمل الصبغة.
مزايا تلوين غرام:
أولاً ، تعرف على شكل البكتيريا ، سواء كانت عصية أم بكتيريا كروية.
ثانياً: معرفة ترتيب الخلايا البكتيرية.
ثالثًا ، قسّم البكتيريا إلى سلبية وإيجابية.
رابعًا: الاستفادة من وجود بكتيريا مسحة.
لمعرفة كيفية تحضير هذه الصبغة:
يجب أن يرتدي أخصائي المختبر (تذكر أن التحليل يقوم به شخص عادي) أولاً ارتداء قفازات طويلة معقمة ، وإعداد منطقة العمل بتهوية جيدة ، والتأكد من أن موقد البنزين والميكروسكوب يعملان على النحو الأمثل قبل البدء في إجراء التلوين. ثم يقوم أحد المتخصصين بتنظيف شرائح المجهر بالماء والصابون لإزالة الأتربة والشحوم وتطهيرها بالكحول. منظف الزجاج أو أي طريقة أخرى يستخدمها أصحاب المعامل.
ثم يأخذ الشخص العينة ويضعها على الشريحة في أنبوب خاص. يمكن بعد ذلك استخدام تلطيخ الجرام لتأكيد وجود البكتيريا في العينة. تمت إضافة طبقة رقيقة جدًا من الصبغة للحصول على التأثير المثالي. يوصى بعدم الانتظار لمدة 24 ساعة بعد جمع العينة ، لأن مرور البكتيريا لفترات طويلة يمكن أن يتلفها ويقلل من استجابتها للصبغة. أضف 1-2 قطرات إلى شريحة زجاجية معقمة مسبقًا وامسحها بالتساوي واتركها لتنعيم الهواء. يتم خلط البكتيريا الموجودة في السائل بحركة دائرية.
يتم تسخين العينة بعد ذلك حتى يتم تثبيت البكتيريا على الشريحة بحيث لا تكون الشريحة زلقة عند استخدام الصبغة مع الأخذ في الاعتبار أن اللهب عبارة عن مخروط أزرق ، قم بتمرير الشريحة فوق اللهب عدة مرات مع تجنب ارتفاع درجة الحرارة ، ثم قم بإصلاح الشريحة بكحول الميثيل ، ثم أضف قطرة من الميثانول واتركها تجف. rystals ، باستخدام مذيلات الأسيتون والإيثانول الملونة ، مع إمساك الشرائح بزاوية حتى يختفي اللون الأرجواني تمامًا ، ثم صب صبغة مضادة على الشرائح ، ثم شطف الشرائح وتجفيفها وشطفها وتركها في الهواء. مراقبة البكتيريا بأحجام مختلفة بواسطة مجهر ضوئي ، ثم التحقق من الصورة المرجعية ، لتأكيد نوع البكتيريا ، من الملائم استخدام الإنترنت.
ملاحظة مهمة: هذه الطريقة السابقة مخصصة فقط لأولئك الذين يعملون في التحليل في المختبرات ، أو طلاب التحليل والعلوم الذين يمكنهم تطبيقه عمليًا للاستفادة في أبحاثهم.
